高效液相色譜儀作為一種分離分析方法，應用廣泛，具有分析效率高、選擇性好、分析速度快、檢測靈敏度高等優(yōu)點。液相色譜儀由高壓輸液泵、進樣系統、溫度控制系統、色譜柱、檢測器、信號記錄系統等部分組成。與經典液相柱色譜裝置比較，具有高效、快速、靈敏等特點。 高效液相色譜儀的工作流程:貯液器中經過濾的流動相由高壓輸液泵以穩(wěn)定的流速或壓力輸送到色譜柱入口;(若采用梯度淋洗方式常需雙泵系統完成流動相的輸送)樣品由進樣器自進樣口注入后隨流動相流經色譜柱,在色譜柱中完成組分分離。分離后的組分隨流動相離開色譜柱依次進入檢測器,檢測器將檢測到的信號輸給記錄儀(工作站)或其它數據處理系統記錄、處理和保存。
高效液相色譜儀進樣和輸液系統分析：
進樣系統：一般采用隔膜注射進樣器或高壓進樣間完成進樣操作，進樣量是恒定的。這對提高分析樣品的重復性是有益的。
輸液系統：
該系統包括高壓泵、流動相貯存器和梯度儀三部分。高壓泵的流速可調且穩(wěn)定，當高壓流動相通過層析柱時，可降低樣品在柱中的擴散效應，可加快其在柱中的移動速度，這對提高分辨率、回收樣品、保持樣品的生物活性等都是有利的。流動相貯存器和梯度儀，可使流動相隨固定相和樣品的性質而改變，包括改變洗脫液的極性、離子強度、PH值，或改用競爭性抑制劑或變性劑等。
